Produiten

Oxidativ Schued un DNA Basen resultéiert allgemeng an d'Bildung vun oxidéierte Purinen, besonnesch 7,8-Dihydro-8-oxoguanin (8-oxoG) an 7,8-dihydro-8-oxoadenin (8-oxoA), déi fréier ass e gutt- bekannt mutagenesch Läsion.Zënter datt 8-oxoG liicht weider Oxidatioun ënnerläit am Verglach mat normale Basen, gouf d'Insertioun vun enger Basis während der DNA Synthese vis-à-vis vun enger oxidéierter Form vun 8-oxoG in vitro ënnersicht.Eng synthetesch Schabloun mat enger eenzeger 8-oxoG-Läsioun gouf fir d'éischt mat verschiddenen Een-Elektronoxidanten oder ënner Singlet-Sauerstoffbedéngungen behandelt an duerno un der Primerverlängerung ënnerworf, katalyséiert duerch Klenow Fragment exo- (Kf exo-), Kallefthymus DNA Polymerase alpha (pol alpha) ) oder mënschlech DNA Polymerase Beta (pol Beta).Konsequent mat fréiere Berichter, sinn dAMP an dCMP selektiv vis-à-vis 8-oxoG mat allen dräi DNA-Polymerasen agebaut.Interessanterweis gouf d'Oxidatioun vun 8-oxoG fonnt fir dAMP an dGMP Insertioun vis-à-vis vun der Läsion duerch Kf exo- mat transienter Hemmung vun der Primer Extensioun op der Plaz vun der modifizéierter Basis ze induzéieren.Ausserdeem ass d'Läsioun e Block wärend der DNA Synthese vu Pol Alpha a Pol Beta.Experimenter mat engem 8-oxoA-modifizéierten Template-Oligonukleotid weisen datt souwuel 8-oxoA wéi och eng oxidéiert Form vun 8-oxoA direkt Insertion vun dTMP duerch Kf exo-.Massespektrometresch Analyse vun 8-oxoG-enthale Oligonukleotiden virun an no der Oxidatioun mat IrCl62 - si konsequent mat der Oxidatioun vun haaptsächlech der 8-oxoG-Site, wat zu der Bildung vun enger Guanidinohydantoin-Moiety als Haaptprodukt resultéiert.Kee Beweis fir d'Bildung vun abasic Siten gouf kritt.Dës Resultater weisen datt eng oxidéiert Form vun 8-oxoG, méiglecherweis Guanidinohydantoin, falsch Liesung a falsch Insertion vun dNTPs während der DNA Synthese direkt kann.Wann esou e Prozess zu VIVO geschitt ass, géif et e Punkt mutagenic lesion duerstellen, déi zu G--> T an G--> C transversions féieren.Wéi och ëmmer, déi entspriechend oxidéiert Form vun 8-oxoA weist haaptsächlech déi korrekt Insertioun vum T wärend der DNA Synthese mat Kf exo-.