Produiten

Ähnlech wéi aner positiv-Strang RNA Viren, Tombusviren ginn replizéiert vum Membran-gebonnenen virale Replikasekomplex (VRC).De VRC besteet aus der p92-virus-kodéierter RNA-ofhängeger RNA-Polymerase (RdRp), der viraler p33-RNA-Chaperone, a verschidde cooptéiert Hostproteine.Fir e funktionnelle RdRp no senger Iwwersetzung ze ginn, sollt de p92 Replikatiounsprotein an de VRC agebaut ginn, gefollegt vu senger Aktivatioun.Mir hu virdru an engem zellfräie Hefextrakt-baséierten Assay gewisen datt d'Aktivatioun vum Tomato bushy Stunt Virus (TBSV) RdRp e soluble Host Faktor (en) erfuerdert.An dësem Artikel identifizéieren mir de celluläre Hëtztschockprotein 70 (Hsp70) als de co-optéierten Hostfaktor erfuerderlech fir d'Aktivatioun vun engem N-terminal ofgeschniddene rekombinanten TBSV RdRp.Zousätzlech hemmt kleng Molekül-baséiert Blockéierung vun der Hsp70 Funktioun d'RNA-Synthese vum Tombusvirus RdRp in vitro.Ausserdeem weisen mir datt neutral Phospholipiden, nämlech Phosphatidylethanolamin (PE) a Phosphatidylcholin (PC), d'RdRp Aktivatioun in vitro verbesseren.Am Géigesaz, weist Phosphatidylglycerol (PG) e staarken an dominante hemmend Effekt op in vitro RdRp Aktivatioun.Mir weisen och datt PE a PC d'RdRp-viral Plus-Strang RNA [(+)RNA] Interaktioun stimuléieren, während PG d'Bindung vun der viraler RNA un d'RdRp hemmt.Baséiert op der stimulatory versus inhibitory Rollen vun verschiddenen phospholipids an Tombusvirus RdRp Aktivéierung, proposéiere mir dass d'Lipid Zesummesetzung vun geziilte subcellular Membranen vun tombusviruses benotzt kënne fir nei VRC Assemblée am Laf vun Infektioun ze regléieren. (RdRp), déi verantwortlech ass fir d'Synthetiséierung vun der viraler RNA Nokomme an infizéierten Zellen vu verschiddene positiv-Sträng RNA Viren, ass am Ufank inaktiv.Dës Strategie ass méiglecherweis viral RNA Synthese am Zytosol ze vermeiden, déi séier zu Induktioun vun RNA-ausgeléiste celluläre antivirale Äntwerte féieren.Wärend der Assemblée vum membrangebonnene Replikaskomplex gëtt de virale RdRp duerch en onkomplett verstane Prozess aktivéiert, deen de RdRp fäeg ass fir d'RNA-Synthese ze maachen.Andeems Dir TBSV RdRp benotzt, weisen mir datt de cooptéierten celluläre Hsp70 Chaperon an neutrale Phospholipiden d'RdRp Aktivatioun in vitro erliichteren.Am Géigesaz, huet Phosphatidylglycerol (PG) en dominante hemmungseffekt op in vitro RdRp Aktivatioun an RdRp-viral RNA Interaktioun, suggeréiert datt de membranöse Mikrodomain ronderëm de RdRp seng Fäegkeet fir d'RNA Synthese staark beaflosst.Also hänkt d'Aktivatioun vum virale RdRp wahrscheinlech vu multiple Hostkomponenten an infizéierten Zellen of.