Produiten

Proteinphosphorylatioun reguléiert verschidde cellulär Funktiounen a spillt eng Schlësselroll an der fréicher Entwécklung vu Planzen.Fir op fréier Ermëttlungen vun der Proteinphosphorylatioun an Arabidopsis Séiwierker ze ergänzen an auszebauen, hu mir eng alternativ Approche benotzt, déi Proteinextraktioun ënner net-denaturéierende Bedéngungen kombinéiert mat immobiliséierter Metal-Ion Affinitéitschromatographie (IMAC) Beräicherung vun intakten Phosphoproteine ​​bei Rubisco-depletéierten Extrakten, gefollegt vun Identifikatioun. benotzt zweedimensional Gelelektrophorese (2-DE) a Flëssegchromatographie-Tandem Massespektrometrie (LC-MS / MS).In-Gel Trypsin Verdauung an Analyse vun ausgewielte Gelflecken identifizéiert 144 phosphoryléiert Peptiden a Reschter, vun deenen nëmmen 18 Phosphopeptiden an 8 Phosphositen an de PhosPhAt 4.0 a P3DB Arabidopsis thaliana Phosphorylatiounsplaz Datenbanken fonnt goufen.Méi wéi d'Halschent vun den 82 identifizéierten Phosphoproteine ​​waren am Kohbhydratmetabolismus involvéiert, Fotosynthese / Atmung oder oxidativ Stressreaktiounsmechanismus SMS.D'Beräicherung vun intakt Phosphoproteine ​​virum 2-DE an LC-MS / MS schéngt d'Erkennung vu phosphoryléierten Threonin an Tyrosinreschter ze verbesseren am Verglach mat Methoden déi Peptid-Niveau Beräicherung benotzen, suggeréiert datt déi zwou Approche e bësse komplementar sinn wat d'Phosphorylatiounsplaz Ofdeckung ugeet.Vergläicht Resultater fir jonk Séiwierker mat deenen, déi virdru fir reife Arabidopsis Blieder kritt goufen, identifizéiert fënnef Proteinen déi differentiell phosphoryléiert sinn an dëse Stoffer, beweist d'Potenzial vun dëser Technik fir d'Dynamik vun der Proteinphosphorylatioun während der Planzeentwécklung z'ënnersichen.