Produiten

Monogalaktopyranosiden vu Fluorescein a Fluorescein Methylester: Synthese, enzymatesch Hydrolyse duerch biotnyléiert β-Galaktosidase, a Bestëmmung vum translationalen Diffusiounskoeffizient

Fluorescein Monoglykosiden (d-Galactopyranoside (FMG) an d-Glucopyranoside) an hire Methylester (MFMG) goufen aus Acetobromoglucose/Galaktose a Fluorescein Methylester a gudde Rendementer virbereet.Enzymatesch Hydrolyse Experimenter (mat biotinyléierter β-Galaktosidase) vun de Galacto-Derivate goufen ausgefouert a kinetesch Parametere goufen berechent.Eng 15-20 Mol Erhéijung vun der Fluoreszenzintensitéit gouf während der Hydrolyse beobachtet.Eng linear Erhéijung vun der Fluoreszenz gouf a kuerzer Zäit a gerénger Konzentratioun vum Substrat bemierkt, wat dës Verbindungen nëtzlech a sensibel Sonden fir Galaktosidasen mécht.D'Gréisst vum Michaelis-Menten konstante (Km) Wäert fir MFMG ass méi héich wéi déi vum FMG, wat eng méiglech konformational Ännerung vum fluorogene Substrat suggeréiert.Km Wäert fir biotinyléiert β-Gal mat FMG ass méi niddereg wéi dee fir den gebiertege Enzym.Dës Observatioun weist méi héich Substrataffinitéit vum biotinyléierten Enzym am Verglach zum gebiertege Enzym un.Iwwersetzungsdiffusiounskoeffizienten goufen gemooss, fir béid fluorogene Substrater a béid Produkter, mat der Fluoreszenz Korrelatiounsspektroskopie.Iwwersetzungsdiffusiounskoeffizienten fir fluorogene Substrate an déi enzymatesch Hydrolyseprodukter goufen ähnlech gemooss, am Beräich vun 3,5-4,5 × 10-10 m2 s-1.Also eng Verbesserung oder Verzögerung vun der enzymatesch Kinetik wéinst Ënnerscheed an der Iwwersetzungsmobilitéit vum Substrat a Produkt ass net sou offensichtlech.